يحقق نظام RPA-CRISPR/Cas12a في هذه الدراسة اكتشافًا سريعًا (30-40 دقيقة) وفائق الحساسية (نسخة واحدة/ميكروليتر) لفيروس HCMV من خلال استهداف جين UL123 المعبر- المبكر، متفوقًا على الطرق التقليدية في اختبار العينات السريرية. ويتيح هذا الابتكار التشخيص في الوقت المناسب لحالات العدوى ذات الحمل الفيروسي المنخفض-المنخفضة-، لا سيما في المرضى الذين يعانون من نقص المناعة، يسلط الضوء على جدوى التشخيص المعتمد على تقنية CRISPR-لتحسين إدارة الأمراض المرتبطة بفيروس التهاب الكبد الوبائي-. تسلط بساطة الاختبار وكفاءته الضوء على إمكاناته باعتباره-نقطة-أداة رعاية للإعدادات المحدودة للموارد-.
أنماط مواقع تضخيم RPA واختيار المجموعة.
(أ) تصميم التمهيدي RPA فيما يتعلق بموقع شظايا التضخيم. تشير الأسهم إلى المواضع الأساسية من البداية إلى نهاية الجزء المضخم باستخدام الاشعال P1-P6.
(ب) صورة التفريد هلام الاغاروز لمنتج RPA تضخيمها مع 6 مجموعات التمهيدي HCMV.
(ج) فحص كفاءة التضخيم لمجموعات RPA من شركات مختلفة. P: التمهيدي، NC: التحكم السلبي.
أشارت النتائج إلى أن مجموعة AmpFuture أظهرت أعلى كفاءة في التضخيم.
مقارنة المعدلات الإيجابية لـ MIRA-CRISPR/Cas12a، PCR - طريقة مسبار الفلورسنت وqPCR في العينات السريرية.
قمنا بجمع عينات الدم والبول من 48 مريضا سريريا. تم استخراج الحمض النووي الجينومي من هذه العينات باستخدام مجموعة TIANamp Genomic DNA Kit، وتم تحليل نتائج اكتشاف UL122 عبر طريقة مسبار الفلورسنت PCR-. وبمقارنة نتائجنا مع التشخيصات السريرية، حددت أساليبنا 6 عينات إيجابية كانت سلبية في الاختبارات السريرية.
